Normatización en los Laboratorios de Genética en la Argentina
(parte general) 1997
I. Consideraciones generales
1) Finalidades
2) Requerimientos mínimos
3) Variaciones
4) Vigencia de esta norma
5) Autores
Finalidades
Estas normas se dictan para promover estudios citogenéticos correctos, precisos y confiables en el marco de las técnicas citogenéticas habitualmente disponibles en nuestro medio. Se entiende que están dirigidos a los citotogenetistas clínicos y son de adhesión voluntaria.
Requerimientos mínimos
Se trata de criterios mínimos considerados aceptables.
Variaciones
Se reconocen variantes aceptables. En estos casos la exactitud y seriedad de estas variantes deben estar debidamente documentadas mediante validaciones internas y por la literatura pertinente.
Vigencia de estas normas
Estas normas sufrirán actualizaciones a intervalos de 1 año para mantener su vigencia en un campo de desarrollo acelerado como lo es la genética clínica. La Comisión de Citogenética Clínica compuesta por:
Dr. Isaac Aranda Dra. Irene Larripa Dra Graciela Del Rey Dr. Roberto Coco Dra. Marta Gallego Dr. Tetsuji Matayoshi
Realizó la redacción de estas normas a pedido de Ministerio de Salud Pública canalizado a través de la Sociedad Argentina de Génetica Médica de AMA.
I. Condiciones generales:
Recursos físicos.
Equipamiento temperatura dependiente.
Gabinete de cultivo celular.
Reactivos.
Libro de protocolo.
Terminología.
Nomenclatura.
Subcontratación.
Control y garantía de calidad.
Informe final.Recursos Físicos
Superficie y equipamiento: cada laboratorio debe contar con espacio y equipamineto que aseguren un nivel aceptable de performance.
Equipamiento Temperatura Dependiente
Heladeras, freezers e incubadoras deben ser mantenidas a la temperatura óptima requerida para cada caso.
Dichas temperaturas deben ser monitoreadas a intervalos a determinar por el responsable del Laboratorio.
En incubadoras de atmósfera modificada se debe controlar:
- temperatura
- gases, semanalmente
- humedad, según criterio del responsable
Deben establecerse dentro del protocolo los procedimientos a seguir en caso de detectarse alguna anomalía
Gabinete de Cultivo Celular
Los gabinetes de bioseguridad CLASE IIA o CLASE IIB son las recomendadas para la manipulación de células, tejidos o fluídos. Flujo latninar de tipo horizontal es adecuado sólo para la preparación de reactivos
- Células analizadas: son aquellas donde se evaluó individualmente cada cromosoma bandeado sea al microscopio, imagen digitalizada, o fotografía.
- Células cariotipadas: son aquellas donde se han recortado y apareado cada homólogo a partir de una fotografía o imagen impresa.
- Células contadas: son aquellas donde se ha constatado el número modal
- Colonia: es un foco de células que se cosecha y se tiñe in situ
- Clon: se considera como tal cuando existen como mínimo dos células con idéntica anomalía (hiperdiploide o con alteración estructural), o tres células (en caso que sea hipodiploide).
- Registro: debe consignarse todos los datos necesarios para ubicar a las células analizadas.
- Bandeo: deben estar capacitados para realizar técnica de bandeo G, R, Q, C, y NOR.
- Grado de resolución: nivel de 400 bandas será el mínimo requerido y de 550 bandas en caso de malformaciones, retardo mental, o abortos iterativos.
- Número de células a analizar: debe ser entre 15 y 20 como mínimo. Sin embargo se deberá adecuar para cada caso según criterio del responsable. La cantidad de células puede ser menor al criterio general establecido en caso de anomalía de tipo familiar o de escasez de material.
Nomenclatura
Se recomienda adoptar la nomenclatura establecida en ISCN 1995.
Subcontratación
Cualquier laboratorio podrá subcontratar otro/s en el caso de
- exceso de caudal de trabas o
- necesidad de técnicas no disponibles en el laboratorio solicitante
En todos estos casos se recomienda aclarar en el informe final la identidad y responsabilidad del laboratorio subcontratado.
Control y garatía de calidad
Todos los laboratorios deben diseñar un programa de control y garantía de calidad de: reactivos, equipamiento, metodologías y el personal.
- Control sobre reactivos para cultivo de células, se debe ejercer básicamente sobre dos aspectos:
* contaminación
* eficiencia
- Lotes nuevos entrarán al circuito recién después de haber sido pre-testeados.
- Control del equipamiento: el responsable de cada laboratorio debe trazar y documentar un plan de control adecuado.
- Control de performance: se puede basar en dos indicadores mayores que son:
* duración del estudio
* tasa de fracasos
Sin embargo, es recomendable participar en por lo menos un programa de evaluación externa.
Informe citogenético
Debe contener como mínimo los siguientes datos:
Del paciente:
- Nombre y apellido
- Fecha de nacimiento
De la muestra:
- Fecha de recepción
- Código de identificación dado al ingresar
- Tipo de muestra
Del médico:
- Nombre y apellido
- Motivo del pedido o diagnóstico presuntivo
Del estudio:
- Número de células estudiadas (contadas, analizadas, cariotipadas)
- Técnicas aplicadas
- Cariotipo según ISCN 1995
- Interpretación del resultado
- Firma y sello del responsable
- Fecha
Informe citogenético
Datos que pueden ser incluídos:
- Nivel de resolución de bandas
- Fotocopia del cariotipo
- Referencia bibliográfica
- Iniciales de técnicos que intervinieron
- Polimorfismos
De tratarse de un estudio prenatal
- método de cultivo
- riesgo sobre futuros embarazos
- ofrecer estudios prenatales para futuros embarazos
- recomendar asesoramiento
- no garantiza un feto normal
- no garantiza detección de microdelecciones
En el estudio de X frágil:
-tipo de medio o método usado.
Cáncer:
- informar todas las anomalías observadas o sólo aquellas con significado clonal
- pronóstico
- recomendar seguimiento
PRECAUCIONES
Incubadora
Se recomienda disponer de por lo menos dos incubadoras totalmente independientes, ubicadas lejos de zonas de tráfico.
Area de cultivo
Se recomienda usar vestimenta adecuada para el trabajo de
- guardapolvo enterizo de frente, manga larga abrochada
- gorra
- barbijo
- guantes
- protección de calzados
- protección de ojos
Dispositivos destinados a los deseclios deben estar ubicados lo más lejos posible del operador.
Lavado de mano: se debe efectuar lavado de mano higiénico:
- después de manipular muestras
- al concluir un procedimiento
- al quitarse guantes
- al salir del laboratorio
Decontaminación de superficies: Se recomienda realizar limpieza de superficies de área (incluído el gabinete) diarian-iente con lavandina al 10% o etanol 70%, manteniendo fuente de radiación UV germicida encendida mientras no se encuentre operando.
Droguero
- Todo el material debe ser fechado al llegar.
- Se recomienda almacenar la mínima cantidad indispensable dentro del laboratorio.
- Sustancias corrosivas deben almacenarse en los estantes inferiores o gabinetes especiales.
- Los inflamables deben permanecer en envases adecuados en gabinetes especiales.
MUESTRA
- Datos que deben acompañar la muestra
- Ingreso de la muestra
- Envíos
- Conservación
Datos que deben acompañar la muestra
De la muestra:
Fecha y hora de obtención. Tipo de tejido: sangre periférica, líquido amniótico, vellosidades coriales, médula ósea, tejido sólido, otros.
Del paciente:
Apellido y nombre
Edad
Sexo
Domicilio y teléfono
Diagnóstico presuntivo y resumen de la historia clínica (conseguir
antecedentes de la transfusión, rayos , medicación, infecciones)
Del médico a cargo:
Nombre y apellido
Institución v teléfono
Ingreso de la muestra al laboratorio
Deben registrarse fecha y hora de ingreso de la muestra al laboratorio junto con todos los datos que la acompañan. Se le dará inmediatamente un código de identificación del laboratorio.
Envío
Se podrá enviar la muestra el mismo elemento con que se efectuó la obtención, debidamente protegida y acondicionada. Se debe tratar de garantizarla llegada al laboratorio de destino dentro de las 24 hs., manteniendo la temperatura debajo de los 20 grados C. Nunca congelar.
Conservación
Conservar:
- una semana si es sangre
- 24 hs. si es m
- 72 hs. si es líquido amniótico o vellosidades coriales
- 48 hs. si es tejido sólido
Estos lapsos deben ser considerados como extremos, sólo aplicables excepcionalmente.
